ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL....: octubre 2014

TOMA DE MUESTRA SANGUÍNEA CON VACUTAINER

El VACUTAINER es una marca comercial de Becton, Dickinson and Company para un tubo de ensayo especialmente diseñado para la venopuncion. Fue desarrollado en 1947 por jhoseph kleiner.

el sistema consiste en extraer sangre intravenosa al vació y específicamente de la región cubital del brazo. se trata de un tubo de vidrio al vacío con un tapón de plástico blando que permite que lo atraviese una aguja mediante una leve punsion.

Existen varios tipos de vacutainer que se diferencian por el color de su tapón. cada color del tapón indica el aditivo, o ausencia del mismo, contenido en el tubo. por ejemplo, los tubos de tapón color lila o violeta contiene EDTA, los de color celeste contienen CITRATO etc.

El significado de cada color esta estandarizado para los distintos fabricantes.

El orden de extracción se refiere a la secuencia en que cada tubo debe ser utilizado. La aguja que perfora los tubos pueden llevar al siguiente tubo sus aditivos característicos, por eso la secuencia también esta estandarizada y así se logra evitar que cualquier tipo de contaminación cruzada no afecte los resultados del laboratorio.

CONTENEDORES CON COAGULANTES

TAPÓN AMARILLO: Con agentes coagulantes y gel para separar el suero.

TAPÓN ROJO: contienen agentes coagulantes y se utiliza cuando se requiere suero.

TAPÓN NARANJA O GRIS: Contiene tombrina, un coagulante rápido, que es utilizado para análisis de urgencia en el suero.

CONTENEDORES CON ANTI COAGULANTES

VERDE: Contiene heparina sódica o litio heparina usada para el análisis en plasma.

VERDE CLARO: para determinaciones químicas en plasma.

VIOLETA: contiene EDTA este es un anticuagulante potente por lo que dichos tubos se usan para el conteo sanguíneo completo y el frotis. los tubos con color lavanda se utilizan cuando se necesita sangre entera. Puede utilizarse también para procedimientos de los bancos de sangre, como tipo sanguíneo y seguridad. Para otros procedimientos de los bancos de sangre, como por ejemplo estudios de compatibilidad sanguínea, deben utilizarse los tubos tapas rosas.

GRIS: Estos contienen floururo y oxalato. El fluoruro evita que las enzimas en sangre trabajen, y así un sustrato como la glucosano se consuma. el oxalato es un anticoagulante.

CELESTE: contiene una medida de citrato. Citrato es un anticoagulante reversible, y estos tubos se usan para ensayo, ya que el citrato liquido diluye la sangre, es importante que el tubo se llene bien para que la concentración sea la esperada.

AZUL OSCURO: Contiene heparina sódica un anticoagulante. también puede contener EDTA como aditivo. estos tubos se utilizan. Estos tubos se utilizan para buscar trazas de metales.

Para la toma de muestra es importante la practica y la seguridad con la que se hace, ya que eso depende de que las muestras sean tomadas correctamente, y también desarrollar el sentido de la sensibilidad para palpar y determinar cual es la vena correcta para determinar la extracción, también es indispensable verificar que el material no exceda su fecha de caducidad ya que este tiene que estar en perfectas condiciones.

NEFELOMETRÍA Y TURBIDIMETRÍA

¿QUE ES? Nefelometría y/o Turbidimetría son métodos analíticos basados en la dispersión de partículas suspendidas en líquidos.

-Turbidimetría: es la medición de la luz transmitida a través de una suspensión, tiene la ventaja de permitir la valorización cuantitativa, sin separar el producto de la solución. Las mediciones, pueden efectuarse con cualquier espectrofotómetro.

-Nefelometría: mide la luz dispersada en dirección distinta a la luz emitida (generalmente con ángulos que oscilan entre 15 y 90º). Utiliza como instrumento el nefelómetro (en el que el detector se ubica con un ángulo que oscila entre 15 y 90º ej. a 90º). Se suele utilizar para concentraciones más diluidas. Permite mayor sensibilidad con concentraciones menores de partículas suspendidas. Constituye un método más exacto para la medida de la opacidad.

¿EN QUÉ SE BASA? Cuando la luz atraviesa un medio transparente en el que existe una suspensión de partículas sólidas, se dispersa en todas direcciones y como consecuencia se observa turbia. La turbidez es la propiedad óptica de una muestra que hace que la radiación sea dispersada y absorbida más que transmitida en línea recta a través de la muestra. Es ocasionada por la presencia de materia suspendida en un líquido. Y para medirla utilizamos ambos métodos. La dispersión no supone la pérdida neta de potencia radiante, sólo es afectada la dirección de la propagación, la intensidad de la radiación es la misma en cualquier ángulo.
En la turbidimetría se compara la intensidad del rayo de luz que emerge con la del que llega a la disolución. En cambio, en la nefelometría la medida de la intensidad de luz se hace con un ángulo de 90º con respecto a la radiación incidente.

El instrumento usado en la nefelometría, el nefelómetro en cambio en turbidimetría se utiliza el turbidímetro que es un fotómetro de filtro. El procedimiento de la nefelometría generalmente es empírico y sólo se consideran 3 factores:
1. La concentración: Mayor sea el número de partículas, mayor es la dispersión.
2. Tamaño de la partícula: Factores como el pH, la velocidad y orden de la mezcla, concentración de los reactivos y la fuerza iónica.
3. Longitud de onda: Generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero si están coloreadas, se debe escoger una porción del espectro electromagnético en la que la absorción del medio se reduzca al mínimo.

DIFERENCIAS TURBIDIMETRIA Y NEFELOMETRIA. La nefelometría se basa en la medición de radiación dispersa, en cambio la turbidimetría en la medición de la intensidad de un haz disminuido.

Factores para la elección entre turbidimetría y nefelometría:
-Intensidad de la radiación transmitida o dispersada con la intensidad de la radiación procedente de la fuente. La mejor elección cuando la muestra contiene pocas partículas dispersantes es la nefelometría. La turbidimetría es buena cuando las muestras contienen grandes concentraciones de partículas dispersantes.
-Tamaño de las partículas dispersantes. En la nefelometría la intensidad de la radiación dispersada a 90º es mayor si las partículas son bastante pequeñas para que se produzca una dispersión Rayleigh. Si las partículas son mayores la intensidad de la dispersión disminuirá. En turbidimetría la señal consiste en la disminución relativa de la radiación transmitida, por lo que el tamaño de las partículas dispersantes es menos importante.

¿PARA QUÉ SE UTILIZA? Se utilizan normalmente en el análisis de la calidad química del agua, para determinar la claridad y para el control de los procesos de tratamiento. También para la determinación de iones sulfato.
Turbidimetría.
-Se utiliza para el análisis de fibrinógeno, triglicéridos, complejos Ag-Ac y otras sustancias.
-Aplicable cuando la dispersión es suficientemente grande (concentración alta de partículas).
Nefelometría.
-Preferible para concentraciones bajas de partículas, ya que la dispersión es menor y la disminución de intensidad del haz incidente es pequeña.
-Se suele utilizar para medir concentraciones específicas de colonias de bacterias en algún medio de cultivo, o de muchas proteínas utilizando el principio de dispersión luminosa molecular.

ESPECTROFOTOMETRIA.

Es un método de análisis que hace uso de la interacción entre la materia y la energía radiante la cual se refiere a como las ondas electromagnéticas se propagan y transportan sin transferencia de materia. se le llama espectofotometria a la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe un conjunto de elementos en su estado puro, en función de la longitud de onda de la radiación lumínica y las mediciones de una determinada longitud de onda.

ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

Es el conjunto de ondas electromagnéticas que comprender desde las mayor energía y menor longitud de onda como son los rayos gamma y rayos X, pasando por la luz violeta, visible (que en realidad ocupa una estrecha franja del espectro electromagnético), infrarroja hasta las ondas electromagnéticas de mayor longitud de onda y menor energía como son las ondas de radio. las ondas electromagnéticas se desplazan a la velocidad de la luz. la región visible del espectro esta comprendida en los rangos de 380 a 750nm.

¿QUE ES UNA LONGITUD DE ONDA?

Es la distancia que hay entre dos picos (o valles) de una onda se llama longitud de onda, esta es la pequeña relación que existe en la distribución de los colores ya que estos se determinan por longitud de onda. ejemplo: cuando la longitud de onda es pequeña hay una alta frecuencia de colores y cuando la longitud de onda es grande hay una baja frecuencia de colores, como lo muestra la siguiente imagen.

ABSORCIÓN ELECTROMAGNÉTICA

Es la interacción de los fotones con los electrones de una sustancia; en este proceso se transfiere energía a la molécula que provoca una disminución en la intensidad de la radiación electromagnética incidente.

cuando un rayo de luz monocromática con una intensidad Io pasa a través de una solución, parte de la luz es absorbida resultando que la luz emergente I es menor que Io.

LAS LEYES DE LAMBERT Y BEER

Los fundamentos de la interrelación de la luz que se absorbe y la que se transmite.

LEY DE LAMBERT: Cuando un rayo de luz monocromática (Io) pasa a través de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente (I) a medida que la longitud del medio absorbente aumenta.

LEY DE BEER: Cuando un rayo de luz monocromática pasa a través de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la concentración del medio absorbente aumenta.

Lo que significa que combinando las dos leyes se crea la ley de BEER-LAMBERT donde la fracción de luz incidente que es absorbida por una solución es proporcional a la concentración de soluto y espesor de la sustancia atravesada por la luz. la relación entre la luz incidente (Io) y la reflejada (I) dará una idea de la cantidad de la radiación que ha sido absorbida por la muestra.

TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA

La transmitancia es la relación entre la intensidad de la luz transmitida por una muestra problema con la cantidad de luz incidente sobre la muestra. La absorbancia es directamente proporcional a la longitud de recorrido a través de la solución y la concentración del color absorbente.

¿COMO SE PUEDE MEDIR LA RADIACIÓN QUE EMITEN O ABSORBEN LOS CUERPOS?

Un aparato capaz de obtener el espectro de una radiación, es decir, de separarar la radiación en sus componentes se llama un ESPECTROSCOPIO

Si el aparato es capaz de fotografiarla se llama un ESPECTOGRAFO

Si es capaz de medirla diremos que se trata de un ESPECTROMETRO

Cuando es capaz de medir también la intensidad de la radiación, se llama ESPECTOFOTOMETRO.

miércoles, 22 de octubre de 2014